酶标仪可以检测一些实质性的感染和病变,避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。
酶标仪单色光一部分被标本吸收,另一部分标本照射到光电检测器上,电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,*后由显示器和打印机显示结果。微处理机还通过控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,实现自动进样检测过程,另一些酶标仪是采用手工移动微孔板进行检测,使酶标仪更小巧,结构也更简单。
酶标仪光是电磁波,波长100nm——400nm称为紫外光,400nm——780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。微孔板是一种经事先包理于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。在使用酶标仪的时候,我们应该注意这些方面:
(一)外观
酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
(二)酶标仪的稳定性(漂移)
选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测量标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测量操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测量值之差不应超过±0.00。
(三)吸光度测量的准确度
选用405,492和620nm波长,以空气为参比,分别测量标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测量3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。
(四)吸光度测量的重复性
波长选用同(3),在酶标板排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测量5次。记录每次测量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。
(五)酶标仪的线性
选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测量3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于测试板的同一孔位中,重复测量3次。
(六)测量速度的检定
选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测量,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。
酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在用于中也应定期检定,以保证酶标仪测量的有效性。