技术文章

Technical articles

当前位置:首页技术文章下面就是多功能酶标仪的免疫吸附试验的基本原理解析

下面就是多功能酶标仪的免疫吸附试验的基本原理解析

更新时间:2022-06-30点击次数:1332
 
  多功能酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动两大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
  多功能酶标仪是我们生活中应用的非常广泛的医疗设备,下面就是多功能酶标仪的免疫吸附试验的基本原理讲解:
  1、先将过量的特异抗体(或抗原)包被于载体(酶标板)上,通过抗原抗体反应使待侧物质(抗原或抗体)和酶标记物(用HRP-辣根过氧化物酶标记的抗体或抗原)也结合在载体上(固相分离),经洗涤去除游离的酶标记物后,加入底物,已经结合在载体上的标记酶促使底物显色。终利用光电比色法,对待测物进行定性判断或定量测定。以上方法的检验灵敏度可以达到ng/ml水平。
  2、包被酶标板:将特异抗原溶液加入酶标板孔内,4℃过夜。然后用洗涤液洗涤3次到5次(洗板机洗板),这样溶液中的特异抗原被牢固吸附在酶标板的微孔表面,形成固相抗原,残液及杂质被清洗掉。
  3、加入被测样本液(病人血清):样本液中若含有待测抗体,经过温育反应,则与已包被的抗原产生特异结合,生成包被抗原与待测抗体的复合物,被吸附在酶标板的微孔表面。然后再次进行洗涤,去除残液及干扰物质。
  4、加酶结合物:经过温育反应,生成包被抗原加待测抗体加酶标抗原的三者复合物,同样被吸附在微孔表面,然后再次洗涤,去除游离的或非特异沾附的酶结合物(洗板)。
  5、加显色液:经过10分钟到20分钟的显色反应,被吸附的复合物中的酶与显色底物液生成有色溶液。此时,由于游离或非特异吸附的酶已被清除,所以溶液颜色的深浅,仅决定于已与待测物结合的酶的量,因此能真实反映待测物的浓度。被固化的酶越多,显色就会越深,这就说明待测物的浓度越大。
  6、加终止液:终止显色反应。
  使用酶标仪检验:把完成显色的酶标板放在酶标仪仪器上进行光电比色检验,仪器分别检测空白孔、阴阳性对照孔、标准孔、质控孔和患者样本孔的吸光度值,并自动按程序要求计算出患者样本中待测物的浓度或进行定性分析。

多功能酶标仪